可見分光光度法測定酒石酸泰樂菌素的含量
引言
酒石酸泰樂菌素是一種十六元大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,在水中溶解度很小,由于其分子中叔胺氮上有孤對電子,它可以與酸(如酒石酸)形成相應(yīng)的鹽類,提高其在水中的溶解度。酒石酸泰樂菌素的檢測方法有微生物檢定法、高效液相色譜法、紫外分光光度法等。近年來,共振光散射光譜法因其靈敏度高、操作簡便,被廣泛應(yīng)用在生物、醫(yī)藥、環(huán)境等領(lǐng)域,但是還未見該方法在酒石酸泰樂菌素檢測中的應(yīng)用?;⒓t是一種熒光素類陰離子染料,已經(jīng)被用于檢測乳糖酸阿奇霉素、硫酸卡那霉素和阿米卡星,還被作為顯色劑檢測蛋白質(zhì),但還未見在酒石酸泰樂菌素檢測中的應(yīng)用。本團隊研究發(fā)現(xiàn),酒石酸泰樂菌素中的泰樂菌素陽離子能與虎紅陰離子發(fā)生離子締合反應(yīng)生成有色離子締合物,其最大吸收波長位于564nm處;二者發(fā)生離子締合反應(yīng),還會使體系的共振光散射強度增大,譜峰位于315nm 處?;谏鲜鲭x子締合反應(yīng)原理,本工作提出了可見分光光度法測定酒石酸泰樂菌素含量的方法,并應(yīng)用于注射用酒石酸泰樂菌素樣品的分析。
儀器與試劑
F-7000型熒光分光光度計;UV-1500型紫外可見分光光度計(上海美析儀器有限公司);FA2204N型電子天平;pHS-3D型酸度計。
酒石酸泰樂菌素標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:0.1g·L-1,取適量酒石酸泰樂菌素標(biāo)準(zhǔn)品,用水溶解和稀釋,搖勻備用。使用時,用水稀釋至所需的質(zhì)量濃度。
虎紅溶液:取適量虎紅,加水稀釋,配制成1×10-4mol·L-1 和5×10-4mol·L-1 虎紅溶液,分別供共振光散射光譜法和可見分光光度法使用。
Clark-Lubs(克拉克-魯布斯)緩沖溶液:取適量0.1mol·L-1鄰苯二甲酸氫鉀溶液、0.1mol·L-1鹽酸溶液以及 0.1mol·L-1 氫氧化鈉溶液,配制 pH3.0和pH3.4的 Clark-Lubs緩沖溶液,分別供共振光散射光譜法和可見分光光度法使用。
酒石酸泰樂菌素標(biāo)準(zhǔn)品純度不小于98.5%;虎紅、鄰苯二甲酸氫鉀、鹽酸、氫氧化鈉均為分析純;試驗用水為去離子水。試驗用樣品為2批市售的不同產(chǎn)地的注射用酒石酸泰樂菌素(標(biāo)示量為2g·瓶-1)。
可見分光光度法
將樣品原液用超純水稀釋2.5倍,得到樣品稀釋液。分取1.00mL 樣品稀釋液、0.75mLpH3.4Clark-Lubs 緩 沖 溶 液 和 2.50mL5×10-4mol·L-1虎紅溶液置于10mL比色管中,混合后于室溫反應(yīng)30min,用水稀釋至刻度,作為測定溶液;取0.75mLpH3.4Clark-Lubs緩沖溶液和2.50mL5×10-4mol·L-1虎紅溶液置于10mL比色管中,混合后于室溫反應(yīng)30min,用水稀釋至刻度,得到空白溶液。將測定溶液和空白溶液分別置于1cm 比色皿中,均以水作參比,在564nm 處測量空白、測定溶液的吸光度 A0 和 A,計算吸光度差值 ΔA=A-A0。
儀器參數(shù)
UV-1500PC紫外可見分光光度計
儀器特點
*采用單片微機控制,128*64位液晶顯示
*寬大的液晶顯示器可顯示多組數(shù)據(jù)
*巨大的內(nèi)存空間,可存儲多組數(shù)據(jù)和曲線
*自動調(diào)0、調(diào)100%功能
*波長自動調(diào)節(jié)
*光源自動切換,濾色片自動切換
*寬大樣品池(5mm~100mm)
*具有最多十點標(biāo)樣建標(biāo)準(zhǔn)曲線測量功能
*可通過直接輸入K、B因子建立標(biāo)準(zhǔn)曲線進行定量測量
*可直接輸入標(biāo)樣和對應(yīng)濃度值建立標(biāo)準(zhǔn)曲線進行定量測量
*可斷電保存測量設(shè)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)
*配備通用并行打印接口,可打印標(biāo)題欄、測量數(shù)據(jù)、曲線參數(shù)、曲線標(biāo)準(zhǔn)樣品點和曲線
*配USB接口
*可通過PC軟件控制實現(xiàn)光譜掃描等更精確和靈活的測量要求
技術(shù)指標(biāo)及基本參數(shù)
*波長范圍: 190~1100nm
*光譜帶寬: 2nm
*波長準(zhǔn)確度:±0.5nm
*波長重現(xiàn)性:≤0.2nm
*透射比準(zhǔn)確度: ±0.3% τ
*透射比重復(fù)性:0.15% τ
*雜散光:≤0.05% τ (220nm NaI,340nm NaNO2)
*穩(wěn)定性: 0.001A/h(500nm預(yù)熱后)
*測光方式:透過率、吸光度、濃度、能量
*波長調(diào)節(jié):自動調(diào)節(jié)
*光度范圍: -0.3~3A
*顯示方式: 128*64液晶
*檢測器:進口硅光二極管
*光源:進口氘燈,進口鎢燈
*電源: AC 220V/50Hz或110V/60Hz
*功率: 120W
*儀器尺寸:480×350×220mm
*主機凈重: 15Kg
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上海美析儀器公司簡介
上海美析儀器有限公司(以下簡稱美析),是一家具有自主知識產(chǎn)權(quán)的高新技術(shù)企業(yè),美析的創(chuàng)業(yè)理念“科技——因你改變”,并以此為企業(yè)宗旨,不斷探究、果敢創(chuàng)新。特別是在分析測試儀器領(lǐng)域,不斷開發(fā)出先進的產(chǎn)品,使美析成為優(yōu)質(zhì)儀器資源的供應(yīng)者。
美析主營光譜類儀器可見分光光度計、紫外可見分光光度計、原子吸收光譜儀、超微量分光光度計、原子熒光光度計、ICP 電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀、ICP 電感耦合等離子體質(zhì)譜儀,目前,我們的產(chǎn)品已廣泛應(yīng)用于有機化學(xué)、無機化學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)藥、環(huán)保、冶金、石油、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。同時美析利用在產(chǎn)品機械結(jié)構(gòu)、光學(xué)設(shè)計、電氣應(yīng)用和軟件開發(fā)方面積累的豐富經(jīng)驗,結(jié)合市場的最新實際需求,近期將陸續(xù)推出一批全新的分析類儀器。美析的總部及生產(chǎn)基地設(shè)在上海,營銷中心設(shè)在北京,并在江蘇、上海、山東三地建有研發(fā)基地。為充分利用各地的智力資源,美析與國內(nèi)外的部分科研單位也進行了深層次的科研合作,不斷將科研成果轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力。為更好的服務(wù)于廣大客戶,美析儀器國內(nèi)設(shè)有 12家辦事機構(gòu),度身定制符合您需求的應(yīng)用解決方案,提高產(chǎn)品的附加值。在不斷服務(wù)國內(nèi)用戶的同時,美析也與 20 多個國家的分銷機構(gòu)建立了深度的戰(zhàn)略合作關(guān)系。
(美析儀器不僅僅只是一家高新技術(shù)認證企業(yè),更通過了 CE 認證、FCC 認證、RoHS 認證以及國內(nèi)多項資質(zhì)審查認證,并有著多項自行研發(fā)的光譜類專利版權(quán)等等)